12 липня 1580 року видані перші пробні екземпляри Острозької Біблії, які містили Новий Завіт і Псалтир.
Рівно через рік і місяць з’явиться перше повне видання Острозької Біблії церковнослов’янською мовою в перекладі з грецької Септуагінти. Перекладачі використовували також відомий раніше рукописний Геннадіївський церковнослов’янський список Біблії і надрукований переклад Франциска Скорини.
Видання стало можливим за ініціативи та через підтримку князя Костянтина Острозького, якому належить і одна з передмов до Біблії. Друк цього шедевра слов’янського книгодрукування здійснив Іван Федоров. Книга друкувалася досить великим тиражем – понад тисячу примірників. Вона розширювала розуміння біблійних основ християнської віри, сприяючи й ідеям духовного оновлення церкви.